体外诱导骨髓CD34+细胞生成血管内皮细胞的方法

目的体外分离狗骨髓CD34+细胞,建立诱导分化血管内皮细胞的方法,并进行生物学鉴定.方法利用免疫磁珠法分离狗骨髓CD34+细胞,在体外经血管内皮细胞生长因子(VEGF)、内皮细胞生长因子(EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导后,观察细胞生长状况,以光镜、电镜进行形态学鉴定,应用免疫组化方法检测冯维靳布兰德因子(Von Willebrandfactor,vWF)表达.结果光镜下细胞单层融合生长,呈铺路石样形态,单个核位于中央,细胞群体倍增时间为35 h.电镜下可见到Weibel-Palade小体,在细胞胞浆vWF染色阳性.结论采用免疫磁珠法可从骨髓获得高纯度的CD34+细胞,在体外诱导分化成血管内皮细胞.