RT-PCR快速检测产KPC型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌临床应用评价

目的 评估荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)和聚合酶链反应(PCR)扩增测序法检测产KPC型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的一致性,分析RT-PCR直接检测临床样本中肺炎克雷伯菌和blaKPC基因的性能.方法 收集碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)非重复临床分离株89株,采用RT-PCR检测和常规blaKPC基因PCR扩增一代测序检测,比较2种方法的检出率和一致性.收集临床送检的痰液样本226份,采用RT-PCR检测肺炎克雷伯菌外膜磷脂蛋白blaphoE基因和blaKPC基因,同时进行传统细菌培养和体外药物敏感性试验,比较二者的符合率.结果 RT-PCR和PCR扩增测序均从89株CRKP中检出87株携带blaKPC基因,2株未检出blaKPC基因,2种分子检测方法符合率为100％,blaKPC检出率为97.8％,blaphoE检出率为100％.226份痰液样本中,以培养法为标准,RT-PCR检测肺炎克雷伯菌blaphoE的敏感性为100％,特异性为99.38％,2种方法符合率为99.56％.以药物敏感性试验结果为标准,RT-PCR直接检测痰样本blaKPC基因的符合率为98.67％,敏感性为95.56％,特异性为99.48％.结论 RT-PCR可快速筛查产KPC型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌,可快速为重症感染患者提供抗感染治疗的依据.