肝细胞生长因子激活剂的抑制剂-1基因对宫颈癌细胞自噬及凋亡调控的影响

目的 探讨肝细胞生长因子激活剂的抑制剂-1(hepatocyte growth factor activator inhibitor-1,HAI-1)基因对宫颈癌细胞自噬及凋亡调控的机制.方法 对数生长期HeLa细胞分为转染组和对照组,转染组转染HAI-1质粒,对照组细胞正常培养.采用实时荧光定量PCR法检测2组细胞HAI-1 mRNA表达情况,采用AO染色和流式细胞术检测2组细胞自噬情况,采用ELISA检测2组细胞自噬相关因子LC3-Ⅱ、LC3-Ⅰ和Beclin-1蛋白水平,应用流式细胞仪检测2组细胞凋亡率,采用Western blot法检测细胞Bax和Bcl-2蛋白相对表达量.结果 转染组细胞HAI-1 mRNA相对表达量(1.57士0.26)、AO细胞荧光强度(52.14士3.88)、LC3-Ⅱ蛋白[(3.42±0.85) μg/L]、Beclin-1蛋白[(14.69士1.96)μg/L]水平、细胞凋亡率[(86.75±6.42)％]、Bax蛋白相对表达量(1.24±0.13)和Bax/Bcl-2 (7.75±0.83)高于对照组[0.48±0.09、5.47±0.32、(1.10±0.22)μg/L、(10.12±0.53)μg/L、(12.64±1.33)％、0.25土0.06、0.17±0.05)](P＜0.05),LC3-Ⅰ蛋白水平[(0.59±0.11) μg/L]、Bcl-2蛋白相对表达量(0.16±0.04)低于对照组[(3.26±0.82)μg/L、1.47±0.15](P＜0.05).结论 HAI-1转染通过增加HeLa细胞中LC3-Ⅱ和Beclin-1蛋白表达,降低LC3-Ⅰ蛋白表达,提高Bax/Bcl-2来调节宫颈癌细胞的自噬和凋亡.