丹参酮ⅡA对大鼠心肌成纤维细胞增殖的影响

目的 探讨丹参酮ⅡA对大鼠心肌成纤维细胞增殖的影响.方法 培养Wistar大鼠原代心肌成纤维细胞,分为对照组、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)组、丹参酮A组(0.01 mmol/L丹参酮ⅡA)、丹参酮B组(0.1 mmol/L丹参酮ⅡA)、丹参酮C组(1 mmol/L丹参酮ⅡA).采用四甲基偶氮唑盐比色法测定细胞增殖率;采用酶联免疫吸附试验检测羟脯氨酸含量;采用实时定量聚合酶链式反应(PCR)法检测大鼠心肌成纤维细胞胶原蛋白Ⅰ型、Ⅲ型、基质金属蛋白酶2(MMP-2)及金属蛋白酶特异性组织抑制2(TIMP-2)mRNA的表达水平;采用Western-blotting测定半乳糖凝集素3蛋白表达水平.结果 5组心肌成纤维细胞间细胞增殖率、羟脯氨酸表达水平、胶原蛋白Ⅰ型、Ⅲ型、MMP-2、TIMP-2 mRNA表达水平、半乳糖凝集素3蛋白表达水平的比较,差异均有统计学意义(F=14.440、13.510、15.860、42.950、3.727、7.357、127.600,P均<0.001).且与对照组相比,AngⅡ组及丹参酮ⅡA各浓度组细胞增殖率[(100.0±2.8)％、(171.2±11.4)％、(162.3±15.9)％、(154.6±17.5)％、(128.7±13.2)％]、羟脯氨酸表达水平[(1.13±0.14)、(2.07±0.23)、(1.89±0.17)、(1.74±0.20)、(1.35±0.16)μg/mg]、胶原蛋白Ⅰ型、Ⅲ型、MMP-2、TIMP-2 mRNA表达水平、半乳糖凝集素3蛋白表达水平均明显上升(P均<0.05).与AngⅡ组比较,丹参酮ⅡA各浓度组细胞增殖率、羟脯氨酸表达水平、胶原蛋白Ⅰ型、Ⅲ型、TIMP-2 mRNA表达水平、半乳糖凝集素3蛋白表达水平均显著下降,且丹参酮C组最低(P均<0.05).而MMP-2 mRNA表达水平在AngⅡ组与丹参酮ⅡA各浓度组间比较,差异均无统计学意义(P均>0.05),且丹参酮ⅡA各浓度组间MMP-2 mRNA表达水平比较,差异亦均无统计学意义(P均>0.05).结论 丹参酮ⅡA可有效抑制心肌成纤维细胞的增殖,其机制可能与抑制半乳糖凝集素3蛋白表达,降低TIMP-2表达相关.