精子表面透明带蛋白受体的分析与功能研究

目的 通过对精子细胞膜表面SLEX/透明带结合蛋白进行定量分析,确定精子透明带结合能力和受精能力.方法 选取2017年1月至2018年12月我院生殖中心76例精液标本(23例正常生育者,53例不育患者),采用半透明带试验(hemizona assay,HZA)分析不育组是否存在透明带结合障碍;采用络合异硫氰酸荧光素的豌豆凝集素(FITG-PSA)荧光标记法检测精子自发顶体反应率;采用流式细胞仪检测精子C1orf56,ZPBP1,SPACA1的免疫反应性以及与荧光标记的SLEX-牛血清蛋白的结合能力;Western Blot检测精子膜蛋白中C1orf56,ZPBP1,SPACA1蛋白的表达水平.结果 不育组53例中32例患者HZI＜30,60.4％的比例存在透明带结合障碍;不育组透明带结合障碍患者的精子自发顶体反应率(25.05±6.45)％明显高于对照组(5.12±2.12)％,差异有统计学意义(P＜ 0.001);在不育组中,透明带结合障碍患者的精子自发顶体反应率(25.05±6.45)％明显高于无透明带结合障碍组(15.32±4.76)％,差异有统计学意义(P＜ 0.001);在精子膜表面SLEX结合蛋白中,不育组透明带结合障碍患者的精子细胞中C1orf56,ZPBP1,SPACA1以及与荧光标记的SLEX-牛血清蛋白的结合比例均降低,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05);在精子膜蛋白中,不育组透明带结合障碍患者的精子细胞中C1orf56,ZPBP1,SPACA1蛋白表达水平均降低,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 受精率低与精子-透明带结合障碍相关,精子透明带结合障碍可能诱导较高水平的自发顶体反应,同时透明带结合异常的精子其细胞膜表面的分子表达受到干扰.