超声靶向微泡破坏技术介导基因JNK1在小鼠肝癌细胞株中表达及对细胞迁移和侵袭作用的研究

目的 探讨应用超声靶向微泡破坏(UTMD)技术介导小鼠肝癌细胞株Hca-P JNK1基因的表达以及肝癌细胞迁移和侵袭.方法 构建并鉴定pCDNA3.1-JNK1载体.将小鼠肝癌细胞株Hca-P分组如下:A组(空白对照组),B组(质粒组),C组(脂质体+质粒组),D组(超声微泡+质粒+超声辐照组),E组(脂质体+超声微泡+质粒+超声辐照组).采用倒置荧光显微镜观察各组细胞的转染率,荧光定量PCR和Western Blot法检测JNK1的基因和蛋白质表达水平,以CCK-8法检测5组细胞的细胞活性,应用Transwell实验检测各组细胞的体外迁移和侵袭能力.结果 成功构建了pCDNA3.1-JNK1载体.各组转染率比较:E组均大于B、C、D组(P均＜0.05),C、D组转染率均高于B组(P均＜0.05),C、D组之间差异无统计学意义(P＞0.05).E组JNK1 mRNA和蛋白表达水平均高于其他各组(P均＜0.05);E组细胞活性、迁移和侵袭能力均高于其他各组(P均＜0.05)结论 UTMD技术结合脂质体转染法可以提高pCDNA3.1-JNK1载体转染小鼠肝癌细胞株Hca-P的效率,加大基因JNK1表达的上调幅度,增强细胞活性、迁移和侵袭能力.