Bcl2基因修饰骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤大鼠实验研究
Trauma and Critical Care Medicine(2019)
摘要
目的 探究Bcl2基因修饰的骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植治疗脊髓损伤大鼠的疗效及作用机制.方法 分离培养大鼠BMSCs并采用Bcl2转染BMSCs建立鼠脊髓损伤模型,随机分为模型组、BMSCs组及Bcl2+BMSCs组,另选取36只健康大鼠作为对照组.脊髓损伤1周后对BMSCs组大鼠进行BMSCs移植,对Bcl2+BMSCs组大鼠移植经Bcl2转染的BM-SCs,对照组及模型组大鼠注射等量生理盐水.移植术后,采用Western blot检测不同时间脊髓损伤周边区Bcl2表达水平,原位末端标记法(TUNEL)染色检测细胞凋亡情况,免疫组化检测神经丝蛋白200(NF-200)及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达量,HE染色探究大鼠脊髓组织及脊髓神经细胞变化,运动功能评分(BBB)评估各组大鼠运动功能恢复情况.结果 细胞移植治疗后,Bcl2+BMSCs组大鼠Bcl2蛋白相对表达量显著高于其他3组,TUNEL染色阳性细胞数显著低于模型组及BMSCs组,NF-200蛋白阳性面积高于模型组及BMSCs组,GFAP蛋白阳性面积低于模型组及BMSCs组,差异具有统计学意义(P<0.05).移植治疗1周后,Bcl2+BMSCs组大鼠脊髓组织细胞及脊髓神经细胞状态、BBB评分均优于模型组和BMSCs组.结论 Bcl2基因修饰BMSCs移植治疗脊髓损伤大鼠,能显著抑制细胞凋亡,促进神经功能恢复,疗效显著.
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