小鼠脓毒症模型外周血和肺组织原位中性粒细胞胞外诱捕网的检测

目的：本研究旨在通过体内和体外实验建立在小鼠脓毒症模型中检测中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）的方法，并初步探讨其与脓毒症肺组织损伤的相关性。方法采用盲肠结扎穿孔手术建立脓毒症小鼠模型，以假手术小鼠作为对照组。术后7 d，采用PicoGreen?染料定量检测小鼠血浆游离DNA，采用髓过氧化物酶（MPO）-DNA ELISA检测小鼠外周NETs复合物的形成，反映NETs生成量。对脓毒症小鼠的肺组织进行病理分析，反映肺组织损伤情况。采用免疫荧光染色法对肺组织原位的NETs形成情况进行鉴定。结果与对照组相比，脓毒症小鼠血浆中游离DNA含量（1650 ng/ml）显著升高（t =21.91，P =0.0021）。MPO-DNA复合物水平（4.85倍）也显著升高（t =15.40，P=0.0042）。脓毒症小鼠的肺组织可见明显损伤，免疫荧光检测显示脓毒症小鼠肺部的NETs形成增加。结论在小鼠中建立了稳定的NETs形成情况鉴定方法，且肺部NETs形成增加是脓毒症模型小鼠肺组织损伤的原因之一。