人脐带间充质干细胞上清液对大鼠肝星状细胞生长的影响

目的 研究人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)上清液对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)生长的影响,探讨hUC-MSCs上清液抑制HSC-T6生长的作用机制.方法 采用组织块贴壁法获得hUCMSCs,并对其进行纯化、扩增、冻存和复苏.低温离心收集hUCMSCs上清液,实验分为对照组、25％hUCMSCs上清液组、50％hUCMSCs上清液组.于培养后不同时间点,观察HSC-T6细胞的形态学变化;MTT法检测HSC-T6细胞的增殖变化;采用Annexin V-FITC/PI检测HSC-T6细胞的凋亡变化;运用免疫组化方法检测HSC-T6细胞TGF-β1、α-SMA的表达变化.结果 组织块贴壁法成功获得hUCMSCs.25％hUCMSCs上清液组、50％hUCMSCs上清液组与对照组相比,HSC-T6细胞数量明显减少,细胞形态更加不规则,突起减少;随着培养时间的增加,25％hUCMSCs上清液组、50％hUCMSCs上清液组与对照组相比,HSC-T6细胞增殖明显受到抑制;HSC-T6细胞凋亡数目明显增多;50％hUCMSCs上清液组较对照组相比,TGF-β1、α-SMA明显减少.结论 hUCMSCs上清液能够抑制大鼠肝星状细胞的增殖及活化;促进肝星状细胞的凋亡;与其抑制大鼠肝星状细胞TGF-β1的表达密切相关.