四种光敏剂介导的体外光动力抗白色念珠菌效果的研究

目的 探讨4种不同类型光敏剂:亚甲基二甲基蓝(9-dimethylmethylene blue,DMMB)、菌绿素 38(Bacteriochlorins 38,BC38)、玫瑰红(Rose Bengal,RB)和尼罗蓝衍生物(5-Ethylamino-9-diethylminobenzo[a]phenothiazinium chlorin,EtNBS),分别介导的光动力抗菌疗法(antimicrobial photodynamic therapy,APDT)对白色念珠菌的体外杀菌效果.方法 以白色念珠菌标准株DAY 286为实验对象,将实验分为4大组:光动力治疗组(APDT组)、单纯光敏剂对照组、单纯光照组及空白对照组.(1)APDT组:根据光敏剂种类不同分为4小组,DMMB组、BC38组、RB组和EtNBS组.不同浓度的各组光敏剂1ml分别与107菌落数/ml白色念珠菌1ml混合,避光孵育30min后,DMMB组和EtNBS组选取波长660nm光源照射;BC38组选取波长730nm光源照射;RB组选择波长540nm光源照射,每组照射光剂量能量密度均为10 J/cm2.(2)单纯光敏剂对照组:分组方式与APDT组相同,各种不同类型光敏剂与菌悬液混合,避光孵育30min后,不予任何光照.(3)单纯光照组:无光敏剂,菌液避光孵育30min后,予APDT组相同条件光源照射.(4)空白对照组:无光敏剂,不予任何光照.实验后的菌悬液经连续梯度稀释接种于培养基,孵育24～36h,进行菌落计数.结果 在能量密度10J/cm2条件下,各光敏药物的浓度分别为DMMB为10μM;BC38为5μM;RB为50 μM;EtNBS为10μM,均清除了99.99％白色念珠菌.当光敏剂浓度为5μM,光能量密度为10J/cm2时,DMMB、BC38、RB 、EtNBS介导的APDT使真菌存活率分别下降99.992％、99.999％、3.5％和99.980％.除APDT组外,其余两组白色念珠菌存活率无明显下降,与空白对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 光能量密度一定时,APDT效果随光敏剂浓度增加而增强.相同光敏剂浓度及光能量密度条件下,DMMB 、EtNBS及BC38对白色念珠菌的APDT效果优于RB.