输血相关急性肺损伤对大鼠血浆和肺组织血管生成素-2表达的影响

目的 探讨输血相关急性肺损伤(TRALI)时血浆和肺组织中血管生成素-2(Ang-2)的表达及其意义.方法 选择60只SD大鼠,按随机数字表法分为生理盐水(NS)对照组、脂多糖(LPS)对照组、TRALI模型组、急性肺损伤(ALI)对照组,每组15只.采用“LPS-血浆二次打击”法复制TRALI大鼠模型.NS对照组腹腔注射NS 2 mL,移除大鼠血液1 mL后输注等体积NS.LPS对照组大鼠腹腔注射2 mg/kg LPS(1 min内注完)1 mL2h后静脉输注等体积NS.TRALI模型组腹腔注射2 mg/kg LPS 1 mL,2h后静脉输注血浆1 mL.ALI对照组静脉输注5mg/kg LPS 1 mL诱导ALI.制模完成后处死大鼠取肺组织观察病理学改变并进行肺损伤评分;取支气管肺泡灌洗液(BALF)检测细胞总数、中性粒细胞比例(NEUT);用蛋白质免疫印迹试验(Western Bolt)检测血浆中Ang-2蛋白表达;免疫组化法观察肺组织中Ang-2阳性表达;实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测大鼠肺组织中Ang-2 mRNA表达水平.结果 光镜下可见,NS对照组大鼠肺组织结构清楚,肺泡壁结构完整,肺泡内未见炎性细胞渗出及肺泡萎陷,肺泡间隔均一无增宽;LPS对照组肺泡间隔轻度增宽、有少量炎性细胞浸润;TRALI模型组肺泡间隔增宽、中等量出血并有较多炎性细胞浸润;ALI对照组肺内大量炎性细胞浸润,间质水肿加重,伴出血、微血栓及灶性肺不张.ALI对照组、TRALI模型组血浆Ang-2蛋白和肺组织Ang-2 mRNA表达均显著高于NS对照组、LPS对照组[Ang-2蛋白(灰度值):0.58±0.09、0.43±0.07比0.12±0.03、0.20±0.05,Ang-2 mRNA(2-△ △Ct):0.39±0.10、0.29±0.09比0.10±0.05、0.16±0.04,P均＜0.01];ALI对照组、TRALI模型组BALF细胞总数(×106/L:361±78、310±76比101±63、165±65)、NEUT(0.396±0.125、0.335±0.115比0.098±0.035、0.114±0.041)均明显高于NS对照组和LPS对照组(P均＜0.05);ALI对照组、TRALI模型组病理学评分、肺湿重/体重比值和动脉血氧分压(PaO2)均显著高于NS对照组和LPS对照组(P均＜0.05).ALI对照组与TRALI模型组各项指标比较差异无统计学意义(P均＞ 0.05).结论 TRALI大鼠肺组织和血浆中Ang-2的表达升高,提示Ang-2可能参与了TRALI病理生理过程.