Wnt/β-catenin通路及uPA在子宫内膜癌中的作用机制研究
Experimental and Laboratory Medicine(2020)
Abstract
目的 探究Wingless/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)通路及尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)在子宫内膜癌(EC)中的作用机制.方法 将人EC细胞KLE分为5组,即对照组、阴性对照组、Wnt-1组、si-uPA组和Wnt-1+si-uPA组,其中Wnt-1组通过转染Wnt-1 pcDNA 3.1质粒上调Wnt-1的水平;si-uPA组通过转染si-uPA质粒敲低uPA的水平.Wnt-1+si-uPA组共同转染Wnt-1 pcDNA 3.1以及si-uPA;空质粒被用于阴性对照组.检测转染后各组细胞Wnt-1、β-catenin、uPA mRNA和蛋白表达水平,以及细胞活力、细胞迁移和侵袭能力.结果 Wnt-1组的Wnt-1、β-catenin、uPA水平均显著高于对照组和阴性对照组,并且Wnt-1的水平会影响uPA mRNA和蛋白的表达.si-uPA组的Wnt-1、β-catenin表达水平变化不显著,而u-PA mRNA和蛋白的水平显著降低.Wnt-1+si-uPA组的Wnt-1和 β-catenin也无显著变化且uPA mRNA和蛋白水平显著低于Wnt-1组.培养48 h后,Wnt-1组细胞活力、细胞迁移率和侵袭率升高而si-uPA组细胞活力、细胞迁移率和侵袭率降低.并且Wnt-1+si-uPA组细胞活力、细胞迁移率和侵袭率显著低于Wnt-1组.Wnt-1组MMP2、MMP9、N-cadherin mRNA水平升高而si-uPA组降低,并且Wnt-1+si-uPA组MMP2、MMP9、N-cadherin mRNA水平显著低于Wnt-1组.结论 在EC细胞中,Wnt/β-catenin的过表达会通过促进uPA的表达促进EC的迁移和侵袭.
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