多重实时PCR和测序技术用于RHC基因分型的研究

目的 探讨多重实时PCR和测序技术用于RHC基因分型的可行性.方法 随机收集2019年11月2日-11月6日期间242名健康献血者血样.使用血清学方法检测标本的Rh CcEe血型表型.使用检测RHCE基因第1外显子48C＞G多态性及第2内含子109 bp插入序列的多重实时PCR方法对血液标本进行RHC基因分型.使用基因测序方法对以上2个多态性位点检测结果不一致的标本进行基因分型.结果 经多重实时PCR基因分型,2个多态性位点分型结果一致者共235例(97.10％),这些标本的分型结果和血清学方法是完全一致的.2个多态性位点分型结果不一致者共7例(2.90％),其中第1外显子48C＞G多态性位点分型结果与血清学方法不符者共4例,假阳性率12.5％ (4/32),而第2内含子的109 bp插入序列分型结果与血清学方法不符者共3例,假阴性率1.43％(3/210).对于多重实时PCR2个多态性位点分型不一致的标本,进行第2外显子测序,测序结果和血清学完全一致.结论 使用检测RHCE基因第1外显子48C＞G多态性及第2内含子109 bp插入片段的多重实时PCR进行RHC基因分型,若二者结果一致,则基因分型结果可靠,若二者检测结果不一致,则可能存在假阴性或假阳性,需要进一步利用基因测序确定.