评估脐带血造血干细胞无菌试验的影响因素

目的 比较含抑菌性物质和无抑菌性物质的脐带血中,不同的细菌检测标本、接种时间对脐带血污染菌活性的影响,评估最佳的脐带血造血干细胞无菌试验的标本和接种时间.方法 用无乳链球菌、表皮葡萄球菌、大肠埃希氏菌、肺炎克雷伯菌各接种6份有抑菌性和6份无抑菌性的脐带血,使试验菌的最终浓度为10个菌落形成单位/mL.制备分离后,采集血浆、红细胞、浓缩干细胞最终产品以及浓缩干细胞最终产品和硫乙醇酸盐培养基或红细胞或血浆的混合物作为细菌检测的标本,立即检测或在室温放置24h后接种营养琼脂平板.结果 脐带血低浓度的细菌污染时,含血浆标本的细菌总数大多低于不含血浆的标本,在含抑菌物质的脐带血标本中差异更为显著.使用红细胞或红细胞稀释的少量造血干细胞最终产品进行细菌检测,标本中的细菌总数高于其他标本,硫乙醇酸盐培养基稀释少量的脐带血干细胞最终产品进行细菌检测可提高浓缩干细胞标本中试验菌的检出量.多数情况下采样后室温放置24h可导致标本中的试验菌数量下降.结论 脐带血中含有抑菌物质可干扰污染菌的生长,脐血库使用红细胞稀释少量脐带血干细胞最终产品作为冻存前无菌试验的标本,并在采样后立即接种,有利于细菌污染的检测.用培养基稀释少量的干细胞最终产品作为解冻后移植前无菌试验的标本,可提高细菌污染的检测效率.