罕见的AEL.05亚型等位基因的鉴定及家系分析

目的 Ael是中国人群中1种较为常见的ABO亚型,其分子机理尚未完全阐明.本文对1例Ael亚型家系进行分子机制研究.方法 在常规血型血清学鉴定的基础上,应用吸收放散法鉴定弱血型抗原;PCR-SSP方法进行ABO基因初步分型;PCR方法扩增ABO基因的7个外显子;对扩增产物进行直接测序和克隆后测序分析.构建3D分子模型,并就突变对α-1,3-N-乙酰半乳糖胺基转移酶稳定性改变(△△G)的影响进行预测.结果 吸收放散试验证明患者红细胞上存在弱A抗原,血清学定型为典型的Ael表型;ABO基因初步分型为A1/O型,测序发现第7外显子767位碱基T＞C突变,导致A糖基转移酶第256位异亮氨酸被苏氨酸替换,血型基因型为ABO*AEL.05/O.01.01.分子模建与分析提示突变导致蛋白局部氢键作用力改变不显著,但突变导致△△G值的升高,表明蛋白稳定性降低.结论 α-1,3-N-乙酰半乳糖胺基转移酶p.I256T突变可能通过降低了酶的稳定性导致Ael表现型.