1,25-二羟维生素D3协同槲皮素抑制高糖诱导SH-SY5Y细胞凋亡的研究

目的 利用高糖环境中的神经母瘤SH-SY5Y细胞产生炎性反应制备糖尿病神经受损细胞模型,观察1,25-二羟维生素D3协同槲皮素对高糖环境中神经细胞保护作用,探讨其分子机制.方法 采用100mmol/L葡萄糖模拟神经瘤细胞高糖环境,噻唑蓝(MTT)观察不同槲皮素浓度(0、25、50、100、200 μmol/L)对细胞的增殖影响.蛋白免疫印迹(Western blot)观察Bcl,Bax,MMP-9蛋白表达,流式细胞仪Annexin-FITC/PI方法分析细胞凋亡,酶联免疫吸附测定法检测细胞上清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)的表达.结果 100 mmol/L葡萄糖明显诱导SH-SY5Y细胞凋亡,MMP-9蛋白表达升高,分泌炎症因子,表现为神经细胞受损.加入1,25-二羟维生素D3(1 nmol/L)和25、50μmol/L槲皮素及两者联合用药可以明显逆转这些变化,其中槲皮素剂量依赖性抑制细胞凋亡和炎症因子表达.结论 槲皮素和1,25-二羟维生素D3能有效保护高糖引起的神经细胞凋亡受损,联合用药有明显的协同作用,实验对指导糖尿病患者使用1,25-二羟维生素D3联合槲皮素预防糖尿病患者神经损伤有积极指导意义.