Sanger测序技术在检测肺癌吉西他滨化疗耐药敏感基因CDA中的应用

目的：分析吉西他滨耐药敏感基因胞苷脱氨酶（CDA）多态性位点突变，以实时荧光定量聚合酶链反应（qPCR）法为参照，探讨Sanger测序技术应用于临床样本检测的适用性。方法随机选取255例ⅢB和Ⅳ期晚期非小细胞肺癌（NSCLC）外周血样本，提取DNA，分别采用qPCR法和 Sanger 测序法检测CDA基因G208A和A79C突变情况，评价Sanger测序法检测的敏感度和特异度。结果255例ⅢB和Ⅳ期晚期NSCLC外周血样本Sanger测序法和qPCR法检测CDA基因突变的成功率分别为98．04％（250／255）和97．25％（248／255）。以qPCR法为参照，Sanger测序法检测的敏感度和特异度分别为92．50％和99．52％，两种方法检测出的突变分型完全吻合。结论采用Sanger测序法可有效检测耐药基因CDA 突变，实现了突变分型，可准确、高通量、高效检测CDA突变位点，为临床NSCLC对吉西他滨用药敏感提供一种有效检测手段。