柯萨奇病毒 A16型快速纯化和中和性单克隆抗体制备与鉴定

目的：建立柯萨奇病毒A16型快速纯化方法，制备中和性单抗，并对单抗进行分析。方法收获CA16培养上清液，超滤浓缩，氯化铯密度梯度离心纯化病毒颗粒，透射电镜鉴定纯化产物。福尔马林灭活CA16，免疫BALB／c小鼠，制备分泌抗CA16特异性单抗的杂交瘤细胞系，用ELISA和中和试验分别对单抗特性进行分析。结果初步建立CA16病毒氯化铯密度梯度纯化方法，电镜显示，病毒颗粒为二十面体立体对称球形结构，病毒直径在20～30 nm间，大小均匀。获得2株分泌抗CA16单抗的杂交瘤细胞系，2株单抗均为IgG2a亚型，Anti／CA16／5效价为103，Anti／CA16／10效价为104。2株抗体的中和效价分别为1∶256和1∶1024。结论初步建立氯化铯密度梯度纯化CA16的方法，筛选出2株具有中和活性的抗CA16单抗，为CA16病毒的基础研究提供重要的原材料。