通用PCR法在痰标本真菌检测中的临床应用

目的 用PCR法进行痰标本真菌检测,并与痰培养结果作比较,以期为临床真菌感染的早期诊断和治疗提供有效手段.方法 160例免疫力低下患者留取痰标本194份×2(均为一式双份),其中一份直接用于PCR扩增,另一份在37 ℃培养1～7 d,如见真菌或可疑菌落,则用无菌棉拭子挑取菌落,再次进行PCR扩增并测序,测序结果与已知真菌序列进行比对,以鉴定种属.然后用配对卡方检验对3种方法(直接PCR、培养、培养后PCR)的检测结果进行统计学分析.结果 194份痰标本接种于科玛嘉平板后培养7 d,其中146份见真菌生长,48份未见真菌生长;痰培养后挑取真菌或可疑菌落进行PCR分析,结果阳性170份,阴性24份;痰标本直接PCR分析,阳性178份,阴性16份.PCR扩增产物经测序、比对发现,除2份为曲霉菌,其余均为白色念珠菌.痰培养法真菌检出率显著低于痰直接PCR法(P=0.000)和痰培养后PCR法(P=0.000);痰培养后,PCR法与痰直接PCR法真菌检出率差异无统计学意义(P=0.115).结论 痰直接PCR和痰培养后PCR在真菌检测中均具有高度敏感性,但是前者操作更加简便、快速,适合临床实验室常规使用.