表面增强拉曼光谱技术检测隐球菌脑膜炎患者血清中CD93+外泌体及其意义

目的 利用表面增强拉曼光谱技术(SERS)检测隐球菌脑膜炎患者血清中CD93+外泌体,以优化该病的监测手段.方法 收集2013年12月～2017年3月在上海长海医院和长征医院确诊的38例隐球菌脑膜炎患者的血清作为实验组,同期体检的38例健康者血清作为对照组.用ELISA法检测血清中的IFN-γ,TNF-α的蛋白表达水平;用超高速离心法分离血清外泌体;用磁珠连接抗体法捕获CD93+外泌体并进行标记,于拉曼光谱仪下检测样本的SERS信号.实验组与对照组计量资料间的比较采用两独立样本的t检验,用Origin75软件对两连续变量进行线性拟合,两变量之间的相关性以Pearson系数表示.结果 SERS检测隐球菌脑膜炎患者血清中外泌体最低浓度为5500个/ml,最低量为110个/ml,log(SERS信号)与log(外泌体浓度)进行线性拟合的R值为0.99596,P<0.0001;SERS检测实验组与对照组血清外泌体CD93的信号值取对数分别为2.75±0.59 vs 2.47±0.15,差异具有统计学意义(t=2.835,P=0.0059);SERS检测实验组血清CD93+外泌体得到的数据与ELISA法检测实验组血清中IFN-γ,TNF-α的结果呈正相关,差异有统计学意义(r=0.389,0.478,P<0.05).结论 该方法可初步提高隐球菌脑膜炎患者血清标本检测的灵敏度,为该病监测提供新的技术思路.