阶梯式离心法血小板提取及鉴定方法的建立

目的 建立一种血小板提取及鉴定方法.方法 选择10名健康志愿者,清晨空腹采集EDTA抗凝静脉血3管,每管2 ml,分为全血细胞管、富血小板血浆提取对照管(对照组)和阶梯式离心血小板提取实验管(实验组).对提纯的血小板进行得率计算、显微镜下形态观察和血小板活性功能试验,并对白细胞特有HGB基因和血小板线粒体ND1基因进行定量分析.结果 对照组和实验组均提取和检测到了血小板,形态学观察发现实验组全部为血小板,无白细胞和红细胞残留;对照组可见血小板和零星的白细胞.实验组血小板获得率显著高于对照组,HGB基因含量显著低于对照组,差异有统计学意义(t=-3.281,-2.865;P＜0.05).实验组ND1基因含量高于对照组,单个血小板活性功能吸光度值低于对照组,差异无统计学意义(t=-0.046,-0.799;P＞0.05).结论 建立了一种阶梯式离心血小板提取及鉴定方法,该方法可用于血小板基因研究和活性功能等实验分析.