双重打击致急性肺损伤大鼠膈肌中泛素-蛋白酶体途径变化的研究

目的：观察大鼠失血性休克(HS)+内毒素二次打击后膈肌组织内蛋白降解途径之一的泛素-蛋白酶体系统组成成分的变化。方法24只SD大鼠随机分为两组：假手术对照组(C组)和二次打击组(HS组)，每组12只。建立“失血性休克-内毒素”二次打击大鼠模型。蛋白免疫印记(Western blot)方法测定大鼠膈肌内E2-14k、MuRF1的蛋白表达；逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测膈肌内泛素和蛋白酶体C2亚基的mRNA表达；采用苏木素-伊红(HE)染色在光镜下观察肺组织病理学改变；另外取膈肌标本固定后做电镜检测。结果蛋白免疫印记结果显示，HS组大鼠膈肌组织中E2-14k及MuRF1的蛋白表达分别为(1.65±0.38、1.88±0.32),与C组（分别为1.17±0.25,1.21±0.24）比较明显增加，差异有统计学意义，P<0.01。RT-PCR分析结果显示，HS组大鼠膈肌组织中泛素及蛋白酶体C2亚基的mRNA表达分别为(0.81±0.28、0.50±0.25，与C组（分别为0.89±0.20比0.50±0.15）比较明显增加，差异有统计学意义，P<0.05。HS组电镜下显示膈肌间线粒体肿胀、嵴减少，外膜模糊、变形，部分溶解破坏等超微结构的改变。结论二次打击大鼠膈肌组织内泛素-蛋白酶体降解途径被激活，可能是引起蛋白降解的重要因素之一。