甲状腺素运载蛋白时间分辨免疫荧光试剂盒的制备和效能评价
Chinese Journal of New Clinical Medicine(2020)
Abstract
目的 制备甲状腺素运载蛋白( transthyretin,TTR)的时间分辨免疫荧光( time-resolved fluoroim-munoassay,TRFIA)试剂盒并对其性能进行评价.方法 将抗TTR的4H2单克隆抗体作为包被抗体包被至96孔板,用Eu3+标记3E4单克隆抗体作为检测抗体,制备双抗体夹心TRFIA试剂盒,应用该试剂盒对42例川崎病(Kawasaki disease,KD)患儿及13名健康儿童的血清进行检测,以稀释回收率、准确度、精密度、稳定性等指标对试剂盒的效能进行评价.结果 该研究制备的TTR TRFIA试剂盒与Western blot法同时检测42份KD临床样本和13份健康样本,两方法 的结果 符合率为100%,特异性强.试剂盒的最低检出浓度为0.05 μg/ml,稀释回收率为88.00%~111.00%,分析内精密度为8.01%~9.17%,分析间精密度为8.88%~11.82%.稳定性实验表明该试剂盒可在4 ℃稳定保存6个月,37 ℃稳定保存7 d.结论 该研究制备的TTR TRFIA试剂盒具有准确性高、方便快捷等优点,适用于大批量临床KD血清样品的TTR检测,为快速区分丙种球蛋白敏感型和无反应型的KD患儿提供了方法 .
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