基因干扰技术抑制精原细胞GDNF mRNA表达的研究

目的 观察精原细胞GDNF基因干扰后精原细胞GDNF mRNA的表达,了解GDNF在精原细胞中的作用机制.方法 设计、构建多个针对GDNF的干扰性小RNA (small interfering RNA,siRNA),转染精原细胞,筛选出对GDNF基因干扰效率最高的GDNF siRNA,用酶标仪测定精原细胞的增殖,流式细胞仪检测精原细胞凋亡率.结果 实验组和对照组精原细胞GDNFmRNA的表达强度分别为12.32±1.22％、54.25±1.34％,细胞凋亡率分别为(25.43±1.91)％、(5.6 1:±0.16)％,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.01);表明构建的阳性表达载体有效抑制了GDNF mRNA表达并诱导细胞凋亡,抑制了精原细胞的增殖.结论 RNAi可有效抑制精原细胞GDNF mRNA和蛋白表达,GDNF在精原细胞增殖过程中具有重要作用.