同位素稀释超高效液相色谱－串联质谱法检测人血清中维生素K1含量

目的 建立同位素稀释超高效液相色谱－串联质谱法测定人血清中维生素K1含量.方法 采用AB Sciex API 4000三重四级杆质谱仪,以稳定同位素标记的2H7－维生素K1为内标,利用甲醇沉淀血清中的蛋白质,然后加入正己烷进行液液萃取,离心后上清液经氮气吹干,用乙腈复溶.用电喷雾离子源( ESI)在正离子模式下,以MRM模式采集数据.结果 该方法的定量下限为0.1 ng/mL,线性范围为0.1～20 ng/mL,r＝0.999 2,日内、日间精密度的CV≤7.78%,回收率在92.23%～99.32%;样品室温放置4 h,处理后自动进样器放置24 h,于－80 ℃环境中反复冻融3次,稳定性均良好;检测1 108份血清样品结果显示90.61%在参考区间内.结论 建立了测定人血清中维生素K1含量的同位素稀释超高效液相色谱－串联质谱法,该法准确度高、检测限低,分析时问题,适合批量处理样品.