Toll样受体4在抗β2 GPⅠ抗体诱导小鼠血管表达黏附分子及组织因子中的作用

目的 探讨Toll样受体4(TLR4)在抗β2糖蛋白Ⅰ(β2GPⅠ)抗体诱导小鼠动脉血管黏附分子及组织因子(TF)表达中的作用.方法 腹腔注射抗β2GPⅠ抗体,分别刺激C3 H/HeN(TLR4正常)与C3 H/HeJ(TLR4点突变)小鼠72 h,用免疫组织化学法观察血管内膜组织中细胞黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)及E-选择素的蛋白质表达水平,用实时荧光定量PCR和western blot方法分别检测血管组织匀浆中ICAM-1、VCAM-1、E-选择素的mRNA和蛋白质表达水平,用实时荧光定量PCR和TF活性检测试剂盒分别检测血管组织匀浆中TF mRNA表达水平及其活性.结果 免疫组化结果示抗β2GPⅠ抗体刺激后的C3H/HeN小鼠血管内膜中ICAM-1、VCAM-1及E-selectin蛋白均表达增强.与生理盐水对照组相比,C3H/HeN小鼠和C3 H/HeJ小鼠经抗β2 GPⅠ抗体刺激后,其血管组织匀浆中ICAM-1、VCAM-1、E-选择素的mRNA和蛋白质表达水平均显著增加(P均＜0.05);但C3H/HeJ小鼠的ICAM-1、VCAM-1、E-选择素的mRNA和蛋白质表达水平均明显低于C3H/HeN小鼠(P均＜0.05).经抗β2GPⅠ抗体刺激的C3 H/HeJ小鼠血管匀浆中TF mRNA表达及生物学活性明显低于C3H/HeN小鼠(P＜0.05).结论 TLR4与抗β2GPⅠ抗体刺激上调小鼠动脉血管组织表达活性分子ICAM-1、VCAM-1、E-选择素及TF密切相关,其分子机制及其在抗磷脂综合征(APS)血栓形成中的病理机制有待深入研究.