脓毒症大鼠血清高迁移率族蛋白B1、Toll样受体4时间-浓度变化关系研究

目的 检测不同时间点脓毒症大鼠血清高迁移率族蛋白B1(HMGB1)及Toll样受体4(TLR4)浓度,探讨脓毒症炎症反应的可能机制,寻找脓毒症早期诊断的潜在生物标志物.方法 以盲肠结扎穿孔(CLP)法构建脓毒症大鼠模型,随机分为CLP组,HMGB1干预组,TLR4干预组,以假手术组(麻醉后开腹翻动盲肠后关腹)及空白组(不做任何处理的正常大鼠)为对照.于CLP术后2、4、8、12、24、48 h以酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测试验动物血清HMGB1及TLR4蛋白浓度,分析其时间-浓度关系.结果 CLP组各检测时间点血清HMGB1浓度较空白组及假手术组明显升高(P<0.05),于24 h达峰;予以HMGB1干预后,相比CLP组,其在术后4 h开始发挥作用,明显降低血清HMGB1浓度(P<0.05);予以TLR4干预,相比CLP组,其在术后2～24 h内明显降低血清HMGB1浓度(P<0.05),相比HMGB1干预组,TLR4抑制发挥作用开始时间更早(2 h,P<0.05),作用更强(12、24 h,P<0.05).血清TLR4蛋白浓度在CLP组呈双峰表达(8、24 h,P<0.05);予以HMGB1干预,相比CLP组,其血清TLR4表达呈单峰(8 h,P<0.05);予以TLR4干预,其血清TLR4变化较为复杂,再次呈现双峰状,峰值提前且增加(4、12 h,P<0.05).结论 HMGB1可能通过TLR4信号通路发挥作用,脓毒症炎症级联反应、炎性细胞因子释放等信号转导通路是复杂的、相互交织的"cross-link"系统,单一改变某个/某些个信号转录调节因子作用有限.