下呼吸道流感嗜血杆菌定植对哮喘小鼠气道炎症的影响及信号通路的研究
Journal of Diagnostics Concepts & Practice(2020)
Abstract
目的:观察下呼吸道流感嗜血杆菌定植对哮喘小鼠气道炎症的影响,并研究其信号通路.方法:采用C57/B6和TLR4-/-小鼠,分别用卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏和激发制备慢性哮喘小鼠模型,用流感嗜血杆菌琼脂菌珠制作气道定植模型(注菌组为2组,注菌后第7天和第21天组),同时设置对应时间(第7天和第21天)的0.9%NaCl溶液注射组及单纯流感定植组、单纯哮喘组,每种小鼠各8组,共16组.在哮喘小鼠气道注菌之后的第7、21天处死小鼠,检测血清中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)含量,采用免疫组织化学法检测小鼠肺组织髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)和核因子κB(nuclear factorκB,NF-κB)的表达,并分别与相同时间的单纯流感定植及0.9%NaCl溶液注射、单纯哮喘对照小鼠相比较;再将C57/B6与TLR4-/-小鼠的实验结果进行比较,同时比较各组小鼠支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中的细胞总数.结果:与相同时间的单纯流感定植及0.9%NaCl溶液注射的对照小鼠相比,有流感嗜血杆菌呼吸道定植的C57/B6和TLR4-/-哮喘小鼠血清中TNF-α含量、肺组织中MyD88和NF-κB的表达以及BALF中的细胞总数均升高(P均<0.05);与同时间对应组C57/B6小鼠相比,合并流感嗜血杆菌呼吸道定植的TLR4-/-哮喘小鼠血清中TNF-α含量、肺组织中MyD88和NF-κB的表达以及BALF中的细胞总数均降低P均<0.05).结论:流感嗜血杆菌在下呼吸道定植可以通过激活TLR4-MyD88通路,促进转录因子NF-κB的表达,加重哮喘的气道炎症,这可能是哮喘发病的重要机制之一.
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