酸性亮氨酸核磷酸蛋白32B在肝癌组织表达增强并促进肝癌细胞生长的研究

目的:检测酸性亮氨酸核磷酸蛋白32B (acidic leucine-rich nuclear phosphoprotein 32B,ANP32B)在肝细胞肝癌组织中的表达水平,并探讨其在肝癌细胞生长中的作用.方法:利用国际权威公共数据库,分析肝细胞肝癌组织中ANP32B mRNA的表达及其与患者生存期间的关系:用蛋白免疫印迹法检测患者肝癌组织样本和敲除ANP32B的肝癌细胞系中的ANP32B蛋白表达水平;并用RNA干扰技术在肝癌细胞系中沉默ANP32B的表达,通过计数检测细胞生长及克隆形成,用流式细胞仪检测其细胞周期和细胞凋亡.结果:通过数据库及肝癌组织样本分析发现,肝癌组织中的A NP32B mRNA表达值(9.763±0.04)相较于癌旁组织(9.293±0.03)明显升高,蛋白表达升高1.78倍,且ANP32B高表达的肝癌患者与ANP32B低表达的患者相比,5年总生存率明显下降,差异有统计学意义(P＜0.01).体外实验发现,2组敲除ANP32B的肝癌细胞和对照组肝癌细胞相比,细胞生长速度明显减慢(29.9×105比23.2×105,15.5×105),克隆形成数目减少(300个比146个比135个),细胞周期发生S期阻滞(47.9％比61.5％比57.1％),细胞凋亡数略有增加(1.8％比7.3％比4.9％).结论:ANP32B在肝癌组织中高表达,在肝癌细胞系中沉默ANP32B表达后可明显抑制细胞生长,细胞周期发生阻滞,细胞凋亡增加.