血小板生成素可体外修复原发性免疫性血小板减少症患者受损的内皮细胞

目的 研究血小板生成素(TPO)对原发性免疫性血小板减少症(ITP)患者内皮祖细胞(EPC)的保护作用.方法 从ITP患者及健康供者标本分离BM-EPCs,将研究对象分为3组:ITP/+TPO组、ITP/-TPO组及正常对照.CCK8法检测TPO对BM-EPC的促增殖作用,流式细胞仪标记小鼠抗人CD133、小鼠抗人CD34和小鼠抗人血管内皮生长因子受体(CD309)单克隆抗体的共表达用以鉴定BM-EPC,免疫荧光实验DiL-Ac-LDL和FITC-UEA-I检测EPCs的数量,成管、迁移实验及BM-EPC与巨核细胞共培养检测BM-EPCs的功能.结果 分离的BM-EPCs培养5 d后呈不规则形、椭圆形,培养7～10 d后呈典型长梭形样.CCK-8检测结果显示,TPO促进EPCs增殖,最佳药物浓度为100 ng/mL.流式细胞仪检测各组BM-EPC,结果显示高表达CD34/CD133/CD309,免疫荧光双染细胞数高于ITP/-TPO组(n=8,P<0.05).与ITP/-TPO组相比,ITP/+TPO组成管能力增强(n=12,P<0.05),共培养巨核细胞数量增多.结论 TPO对ITP患者受损的内皮细胞具有修复作用,主要表现为成管功能及巨核细胞支持功能明显增强.