基于Ion Torrent的乙肝病毒耐药基因突变检测方法的建立与初步分析

目的 建立可用于指导临床用药的HBV耐药基因位点高通量测序检测方法.方法 设计可覆盖全部耐药位点的区域的高通量测序建库引物,利用耐药位点区域存在差异的乙肝基因组质粒梯度混合模拟样品对高通量测序方法的突变率检测能力进行评价.结果 建立了适用于ion torrent平台的扩增子文库构建方法,该方法可对HBV＞100 IU/ml的血清进行建库,对模拟样中突变率在5％以上的位点可很好地检出(信噪比＞10).结论 初步建立了高通量测序检测HBV耐药突变的检测方法,为临床动态监测乙肝病毒耐药区域变异、指导临床合理用药奠定了基础.