miRNA-638对巨噬细胞内胆固醇外流的影响及其发生机制研究

背景 流行病学研究表明生活方式、饮食结构等外部因素的改变与遗传因素相互作用导致人体脂代谢紊乱,而胆固醇逆转运过程能够维持体内胆固醇稳态.目的 探讨miRNA-638对巨噬细胞内胆固醇外流的影响及其发生机制.方法 实验于2016年9月—2017年9月完成.采用100 ng/ml佛波酯诱导人髓系白血病单核细胞(THP-1)贴壁并分化为巨噬细胞,根据预实验结果选取浓度为20 nmol/L的miRNA-638模拟物及其阴性对照物进行转染.采用NBD-胆固醇分别检测转染miRNA-638模拟物及其阴性对照物巨噬细胞经载脂蛋白AI(ApoAI)、高密度脂蛋白(HDL)及标准血清外流液介导的胆固醇外流率;采用实时荧光定量PCR及Western blotting检测转染miRNA-638模拟物及其阴性对照物巨噬细胞中三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)、三磷酸腺苷结合盒转运体G1(ABCG1)和极低密度脂蛋白受体(VLDLR)mRNA及其相对表达量.结果 转染miRNA-638模拟物巨噬细胞经ApoAI外流液介导的NBD-胆固醇外流率低于转染阴性对照物巨噬细胞(P<0.05);转染miRNA-638模拟物巨噬细胞与转染阴性对照物巨噬细胞经HDL、标准血清外流液介导的NBD-胆固醇外流率比较,差异无统计学意义(P>0.05).转染miRNA-638模拟物巨噬细胞的ABCA1、ABCG1、VLDLR mRNA相对表达量低于转染阴性对照物巨噬细胞(P<0.05).转染miRNA-638模拟物巨噬细胞中ABCA1、ABCG1相对表达量低于转染阴性对照物巨噬细胞(P<0.05);转染miRNA-638模拟物巨噬细胞与转染阴性对照物巨噬细胞中VLDLR相对表达量比较,差异无统计意义(P>0.05).结论 miRNA-638可减少由ApoAI介导的巨噬细胞内胆固醇外流,该作用可能是通过调控ABCA1/ABCG1的表达实现的.