同型半胱氨酸通过YAP通路调控大鼠冠状动脉血管平滑肌细胞高反应性的作用机制研究

背景 冠状动脉血管平滑肌细胞(VSMC)高反应性是导致冠状动脉痉挛的关键,而高同型半胱氨酸(Hcy)能诱导冠状动脉痉挛,但其具体作用机制尚不完全清楚.目的 探讨Hcy通过YAP通路调控冠状动脉VSMC高反应性的作用机制.方法 2018年1—10月,将SD大鼠实施安乐死后在无菌环境中迅速去除心脏并制成长1.0～1.5 mm血管环.将新鲜的冠状动脉血管环作为A组;在37℃、5％CO2条件下,将在DMEM低糖培养基中培养的冠状动脉血管环作为B组,将在Hcy+DMEM低糖培养基中培养的冠状动脉血管环作为C组,将在维替泊芬(VP)+DMEM低糖培养基中培养的冠状动脉血管环作为D组,将在Hcy+VP+DMEM低糖培养基中培养的冠状动脉血管环作为E组;除A组外冠状动脉血管环均培养24h.采用微血管张力检测仪检测内皮素B型受体激动剂蛇毒类似物(S6c)和内皮素1(ET-1)诱导的冠状动脉血管张力,采用Western blot法检测内皮素A型(ETA)受体、内皮索B型(ETB)受体、YAP、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)、ERK1/2、磷酸化mTOR(p-mTOR)、mTOR、磷酸化AMPK(p-AMpK)、AMPK及Sirt1的表达水平.结果 (1)Hcy可增强S6c和ET-1呈浓度依赖方式介导的冠状动脉血管收缩.C组冠状动脉血管环的ETA受体/β-actin、ETB受体/β-actin及YAP/β-actin高于A组和B组,B组冠状动脉血管环的ETB受体/β-actin及YAP/β-actin高于A组(P＜0.05).(2) VP能有效抑制由Hcy上调的S6c和ET-1呈浓度依赖方式介导的冠状动脉血管收缩.C组大鼠冠状动脉血管环ETA受体/β-actin、ETB受体/β-actin及YAP/β3-actin高于B、D、E组(P＜0.05).(3)C组冠状动脉血管环p-ERK1/2/ERK1/2、p-mTOR/mTOR高于B、D、E组(P＜0.05);B组冠状动脉血管环p-ERK1/2/ERK1/2高于D组,p-AMPK/AMPK及Shirt 1/β-actin高于C、D、E组(P＜0.05).结论 Hcy可能通过YAP通路激活ERK1/2和mTOR信号通路,上调VSMC内皮素受体,进而增强冠状动脉VSMC高反应性,这将为高Hcy致冠状动脉痉挛的具体作用机制研究提供新的理论依据.