miR-191在香烟烟雾抽提物所致肝细胞胰岛素抵抗中的作用研究

目的 探讨miR-191在香烟烟雾抽提物(CSE)所致人肝上皮L-02细胞IR中的作用.方法 建立CSE诱导L-02细胞IR模型.预实验根据CSE不同处理浓度分为正常对照组(NC,CSE 0μg/ml)、CSE10组(CSE 10μg/ml)、CSE20组(CSE 20μg/ml)、CSE40组(CSE 40μg/ml)和CSE80组(CSE 80μg/ml).实验组分为正常对照组(NC)、CSE 40μg/ml单独处理组(CSE)、CSE 40μg/ml联合miR-191抑制剂处理组(CSE+Anti-miR-191)、CSE 40μg/ml联合抑制剂空载处理组(CSE+Anti-miR-NC).ELISA检测细胞内糖原含量和葡萄糖的摄取水平;qRT-PCR检测细胞中miR-191表达;Western blot检测蛋白水平;瞬时转染技术探讨miR-191在CSE诱导L-02细胞IR中的作用.结果 CSE染毒后,L-02细胞对葡萄糖的摄取和细胞内糖原含量降低,p-IRS-1、IRS-1和p-Akt蛋白水平降低,而miR-191表达水平升高(P<0.05).与CSE组比较,CSE+Anti-miR-191组miR-191表达降低,葡萄糖摄取、糖原含量、p-IRS-1、IRS-1和p-Akt表达升高(P<0.05).结论 miR-191通过IRS-1/Akt信号通路在CSE诱导肝细胞IR中发挥作用.