和厚朴酚对ox-LDL诱导的血管内皮细胞损伤的 保护作用及其机制研究

目的 探讨和厚朴酚对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)所诱导的人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)损伤的保护作用及其机制.方法 体外培养HUVECs,采用细胞增殖-毒性检测(CCK8试剂盒法)检测不同浓度(0.1、1、10、50、100μmol/L)和厚朴酚对正常HUVECs的毒性作用;采用100 mg/L ox-LDL诱导24 h建立HUVECs损伤细胞模型,同时给予不同浓度和厚朴酚,CCK8法检测细胞增殖,流式细胞仪检测活性氧(ROS)水平,比色法测定细胞上清液中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)以及谷胱甘肽(GSH)的水平;采用流式细胞仪检测凋亡水平;免疫印迹法检测凋亡相关蛋白和内质网应激(ERS)相应的信号通路改变.结果 低浓度(0.1、1、10μmol/L)和厚朴酚对HUVECs细胞无毒性作用,高浓度(50、100μmol/L)和厚朴酚干预下细胞增殖能力减弱.与对照组比较,ox-LDL组细胞增殖受到明显抑制(P<0.05);而不同浓度和厚朴酚(0.1、1、10μmol/L)处理后,细胞增殖能力逐渐恢复(P<0.05).Ox-LDL组较对照组ROS水平明显增加(P<0.05);而ROS水平随着厚朴酚浓度增加不断减少(P<0.05).同时,与ox-LDL组比较,和厚朴酚处理后细胞上清中SOD、CAT和GSH水平增加,MDA水平降低(P均<0.05).与ox-LDL组比较,和厚朴酚处理组HUVECs凋亡水平明显下降(P<0.05),Bcl-2/Bax比率增加,cleaved caspase3表达下降(P均<0.05).而且与对照组比较,ox-LDL组内质网应激相关蛋白p-elF2α、p-PERK、ATF4和CHOP的表达增加,而和厚朴酚处理后上述蛋白表达均显著下降(P均<0.05).结论 和厚朴酚可能通过抑制氧化应激和内质网应激保护ox-LDL诱导的内皮细胞损伤.