药物处理对失眠症斑马鱼睡眠的影响以及相关作用机制

目的 观察药物处理对失眠症斑马鱼睡眠的改善作用,并探讨银杏叶滴丸(GBP)对γ-氨基丁酸A型受体α1亚单位(GABRA1)和褪黑素受体1类亚型(MTNR1)mRNA表达的影响.方法 采用咖啡因诱导活体斑马鱼建立失眠模型,分别水溶给予GBP(低剂量组56μg/mL、中剂量组167μg/mL、高剂量组500μg/mL)、金纳多(Ginaton,低剂量组56μg/mL、中剂量组167μg/mL、高剂量组500μg/mL)和氯化锂(阳性对照组,500μM),同时设置正常对照组和失眠组,应用行为分析仪定量斑马鱼处于失眠状态的时间,评价GBP对斑马鱼睡眠的改善作用.另取失眠模型斑马鱼,水溶给予GBP 56、167、500μg/mL,同时设置正常对照组和失眠组,采用RT-PCR检测GABRA1和MTNR1 mRNA的相对表达量.结果 在观察的1 h(3600 s)内,失眠组斑马鱼失眠时间多于正常对照组,(1598±277)svs.(1240±129)s,差异有统计学意义(P<0.01).阳性对照组斑马鱼失眠时间为(1368±170)s,少于失眠组,差异有统计学意义(P<0.05).低剂量、中剂量、高剂量的GBP对睡眠的改善作用分别为72%、95%和97%.低剂量、中剂量、高剂量的Ginaton对睡眠的改善作用分别为78%、80%和95%.与正常对照组比较,GBP低剂量组GABRA1 mRNA相对表达量降低,差异有统计学意义(P<0.01);失眠组、GBP中剂量组和高剂量组无明显变化,差异无统计学意义(P均>0.05);与失眠组比较,GBP低剂量组GABRA1 mRNA相对表达量降低,差异有统计学意义(P<0.01).MTNR1 mRNA相对表达量:与正常对照组比较,失眠组、GBP低剂量组和高剂量组降低,差异有统计学意义(P均<0.01),GBP中剂量组无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05);与失眠组比较,GBP低剂量组、中剂量组和高剂量组均升高,差异有统计学意义(P均<0.01).结论 低、中、高浓度银杏叶滴丸和金纳多对失眠症斑马鱼睡眠均有显著改善作用;银杏叶滴丸改善睡眠的可能机制为抑制GABRA1的表达和改善MTNR1的表达.