替米沙坦对糖尿病高血压大鼠肾内小动脉重构的影响

目的：探讨糖尿病高血压大鼠（DSHR）的肾内小动脉（IRSAs）的重构及替米沙坦对IRSAs重构的影响。方法40只12周自发性高血压大鼠（SHR）随机分成4组，SHR对照组、DSHR组、高剂量治疗组、低剂量治疗组，每组10只。同时20只12周龄、性别配对的京都威斯特（WKY）大鼠随机分2组，一组为正常对照组（WKY组），一组制成DWKY组，各组均为10只。低剂量治疗组、高剂量治疗组为SHR雄性大鼠STZ建模后，分别给予替米沙坦灌胃。其余仅给予蒸馏水灌胃。DSHR组及DWKY组仅注射链脲佐菌素（STZ）建模。8周后终止实验。取左侧肾脏经苏木素-伊红（HE）、苦味酸－天狼猩红（Sirius-red）、弹力纤维和胶原纤维双重染色（P/VB法），IRSAs按血管外径大小分20~49μm组、50~99μm组、100~200μm组，计算机辅助成像系统计算各组IRSAs血管壁面积（WA）、血管壁厚（WT）、血管腔径（ID）及壁腔比（WT/ID）。各组切片以α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、鼠抗人巨噬细胞单克隆抗体（ED1）、Ⅲ型胶原（COLⅢ）抗体免疫组化染色，ED1阳性细胞计数，COLⅢ光密度IOD比较。原位末端标记（TUNEL）检测IRSAs血管壁细胞凋亡、增殖细胞核抗原PCNA免疫组化评估IRSAs血管壁细胞增殖，分别计算凋亡指数（AI）和增殖指数（PI）。结果①与WKY组比较，DWKY组血管WT增加，ID明显减小，差异有统计学意义（P均＜0.05）。外径50~99μm组与100~200μm组的IRSAs重构相似，但50~99μm组WT/ID增加更为显著。与DWKY组和SHR组比较，DSHR组WT、WA、WT/ID均升高，差异有统计学意义（P均＜0.05）。替米沙坦干预8周，高剂量治疗组和低剂量治疗组WT、WT/ID及WA均较DSHR组明显改善，差异有统计学意义（P均＜0.05）。②SHR组和DWKY组血管PCNA阳性率比WKY组增高；与DSHR组比较，高剂量治疗组和低剂量治疗组PI均显著降低，但二者阳性差异有统计学意义（P＜0.01）。高血压合并糖尿病时细胞PCNA阳性较单一糖尿病或高血压明显，虽然无论高剂量还是低剂量替米沙坦治疗8周均能明显减少血管壁PCNA阳性细胞数，但前者作用更为明显。③与WKY组比较，DSHR组、SHR组、DWKY组IRSAs中膜凋亡细胞指数减少，差异有显著统计学意义（P均＜0.01）。④肾小球数目：与WKY组比较，DWKY组肾小球数目明显减少[（423.8±37.4）个 vs.（338.7±40.5）个]，差异有显著统计学意义（P均＜0.01），SHR组未见肾小球明显减少。DSHR组较DWKY组肾小球减少[（301.4±35.2）个vs.（338.7±40.5）个]，差异有统计学意义（P＜0.05）。⑤血管外膜及周围COLⅢ光密度（IOD）：与WKY组比较，SHR组和DWKY组血管外膜COLⅢ组化染色IOD值增加，差异有统计学意义（P均＜0.05）；与SHR组及DWKY组比较，DSHR外膜及血管周围COLⅢ组化染色IOD值增加，差异有统计学意义（P均＜0.05）。高剂量治疗组较DSHR组IOD值显著减少，差异有统计学意义（P＜0.01）。⑥替米沙坦治疗对DSHR的影响：高剂量替米沙坦能降低血压，低剂量不影响大鼠血压。治疗组能够减轻WT、WA、WT/ID增加、减少中膜细胞增殖，减轻肾小球减少及减少COLⅢ过度沉积，高剂量治疗组作用较低剂量治疗组明显。结论①DWKY、SHR、DSHR的IRSAs均发生明显重构，以DSHR重构最为显著。②RSAs重构的细胞学机制主要与中膜VSMC的增殖、凋亡失衡和COLⅢ过度沉积有关。③高剂量与低剂量替米沙坦治疗均能减轻IRSAs重构，高剂量更为有效。替米沙坦减轻血管重构（VR）可能与改善增殖凋亡平衡等作用有关。