小窝对氧化型低密度脂蛋白诱导小鼠主动脉内皮细胞一氧化氮合酶减弱的作用

目的 探讨氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)对小鼠主动脉内皮细胞中内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)的影响及可能机制.方法 体外培养小鼠主动脉内皮细胞,按照0 mg/L组(对照1组)、25 mg/L组、50 mg/L组、100 mg/L组的ox-LDL浓度梯度分别处理24 h.Westernblot检测eNOS、磷酸化eNOS和Caveolin-1(Cav-1)蛋白表达.为了进一步验证ox-LDL是通过影响Cav-1进而减弱eNOS和磷酸化eNOS蛋白表达,设立对照2组和siRNA组,应用Cav-1-mus小干扰RNA(siRNA)敲减Cav-1基因后,观察eNOS和磷酸化eNOS蛋白表达.结果 与对照1组比较,25 mg/L组、50 mg/L组、100 mg/L组Cav-1、eNOS和磷酸化eNOS蛋白表达明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).siRNA组Cav-1、eNOS和磷酸化eNOS蛋白表达较对照2组明显降低(0.07±0.02 vs 0.45±0.12,P＜0.01;0.34±0.13 vs 0.85±0.38,P ＜0.05;0.47±0.18 vs 0.86±0.13,P＜0.05).结论 ox-LDL降低内皮细胞eNOS蛋白表达可能是通过影响Cav-1蛋白表达而发挥作用.