同型半胱氨酸硫内酯诱导半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12途径对内皮细胞凋亡的影响

目的 探讨同型半胱氨酸硫内酯(HTL)是否通过半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)12凋亡途径影响内皮细胞生长.方法 体外培养内皮细胞ECV304,先将0、50、100和200 μmol/L的HTL干预细胞24 h,MTT法检测细胞增殖抑制率;随后以200μmol/L的HTL干预0h、3h、16h和24 h,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡情况,再以200μmol/L HTL刺激细胞为观察组(3、16和24 h),不加HTL刺激的细胞为对照组,2组分别采用免疫组织化学染色和Western Blot法检测Caspase-12、Caspase-3和Bcl-2蛋白表达情况.结果 100和200 μmol/L的HTL作用细胞24 h,细胞活性分别为0.76±0.01、0.73±0.01;200 μmol/L HTL对细胞的抑制作用具有时间依赖性,与0h比较,3、1 6和24 h的细胞活性下降明显(0.87±0.04、0.83±0.04、0.78±0.01 vs 0.90±0.07,P＜0.01).与对照组比较,观察组Caspase-12蛋白、Caspase-3蛋白表达增加(P＜0.05,P＜0.01);Bcl-2蛋白先增高后降低(P＜0.01).结论 Caspase-12途径参与HTL致细胞凋亡的过程,Bcl-2也参与其调控.