4,4'-二异硫氰基芪-2,2'-二磺酸对血管紧张素Ⅱ诱导心肌细胞肥大的作用

目的 探讨氯通道阻滞剂4,4’-二异硫氰基芪-2,2'-二磺酸(DIDS)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导H9C2心肌细胞肥大的作用及其可能机制.方法 应用AngⅡ1μmol/L刺激心肌H9C2细胞株,构建心肌细胞肥大模型,观察12、24、36、48和72 h各项表达,另给予50、100、200 μmol/L DIDS预处理H9C2细胞,细胞分组:空白组、AngⅡ组、DIDS组、AngⅡ+DIDS组;免疫荧光染色测量细胞表面积,BCA法检测蛋白含量,实时定量PCR法检测心肌肥厚基因心房钠尿肽(ANP)和肌球蛋白重链(β-MHC) mRNA表达,二氯荧光素二乙酸检测活性氧水平.结果 48 h细胞表面积最大(50 166±2697)μm2和总蛋白含量最大(1.68±0.06)mg/107个,36 h ANP mRNA为4.08±0.38和β-MHC mRNA为2.80±0.18,表达量均最高.与空白对照组比较,AngⅡ组心肌细胞表面积、总蛋白含量、ANP、β-MHC mRNA表达量和细胞内活性氧水平明显增加(P≤0.05),DIDS组无显著差异(P＞0.05);与AngⅡ组比较,DIDS+ AngⅡ组的心肌细胞表面积明显减小(P≤0.05)、总蛋白含量明显减少(P≤0.05)、ANP mRNA和β-MHC mRNA表达量明显减低(P≤0.05)、细胞内活性氧水平明显下降(P≤0.05).结论 DIDS可以有效抑制AngⅡ诱导的H9C2心肌细胞肥大,其机制可能与降低活性氧的水平有关.