三七三醇皂苷通过PI3 K/Akt通路减轻大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤的研究

目的 探讨三七三醇皂苷(PTS)对心肌缺血/再灌注(I/R)大鼠心肌功能及磷酸肌醇—蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路的影响.方法 将40只雄性Wistar大鼠随机数字表法分为5组,每组8只.对照组、I/R组、PTS组、LY294002组、LY294002+PTS组,通过Langendorff离体心脏灌流装置建立心脏缺血/再灌注模型,收集不同时刻的灌流液测量心肌酶学指标(CK-MB、LDH),并记录不同时刻左心室血流动力学参数(HR、LVESD、LVEDD、LVDP、±dp/dtmax);Western-blot检测心肌组织中Akt、p-Akt、GSK-3β、p-GSK-3β的表达,免疫组化检测Bax、Bcl-2、Caspase-3的表达.结果(1)血流动力学参数:对照组HR不同时点无明显变化(P>0.05),其余各组均不同程度上升,且除对照组外其余4组在再灌注75 min时无明显差异(P>0.05).对照组不同时点LVESP、LVEDP、LVDP、±dp/dt max无明显变化,其余各组随时间延长出现不同程度下降.再灌注75 min时,PTS组明显低于模型组(P<0.05),而LY294002+PTS组与模型组无明显差异,与PTS组差异显著(P<0.05).(2)CK-MB、LDH:对照组不同时点无显著变化,其余各组再灌注后心肌酶水平均较缺血30 min有显著提升(P<0.05).各组平衡20 min时无明显差异(P>0.05);局部缺血30 min时,各组CK-MB无统计学差异(P>0.05),而各组LDH较对照组有所升高(P<0.05);再灌注15min、75 min时,各组均较对照组明显升高,PTS组明显低于模型组,LY294002+PTS组高于PTS组(P均<0.05).(3)Akt、pAkt、GSK-3β、pGSK-3β 的表达:缺血再灌注损伤后,各组心肌组织Akt、GSK-3β 表达无统计学差异(P>0.05),pAkt、pGSK在PTS组中表达较模型组有显著提高(P<0.05),在应用LY294002的2组中表达较模型组显著下降(P<0.05),且LY294002+PTS与PTS组差异存在统计学意义(P<0.05).(4)Bax、Bcl-2、Caspase-3的表达:模型组Bax、Caspase-3显著高于对照组(P<0.05),PTS与LY+PTS 2组Bax、Caspase-3表达低于模型组(P<0.05).对照组Bcl-2强阳性,模型组显著低于对照组(P<0.05),PTS组较模型组显著提高(P<0.05),LY294002+PTS组显著低于PTS组(P<0.05).结论 PTS可改善心肌I/R大鼠离体心脏功能,可能与其调节PI3K/Akt信号通路有关.