超声靶向微泡破坏促进EGFP在walker 256细胞内转染的实验研究

目的：评价超声辐照在促进绿色荧光蛋白基因（EGFP）转染至walker256细胞中的作用。
　　方法：将多聚赖氨酸涂于24孔板内12 h，然后将walker256悬浮细胞种植于24孔板内，细胞密度3.0×106/孔，24 h后吸去培养基去除未贴壁细胞，更换转染液进行超声辐照。辐照条件为：输出功率2.0 w/cm2，输出频率1MHz，占空比20%，辐照时间45s；转染液配比为Opti-MEM：sonovue：EGFP=685μl：300μl：15μl，总体积为1 ml，sonovue浓度为30%，EGFP质粒浓度为1μg/μl。辐照分为单纯辐照组、单纯质粒组和辐照+质粒组。单纯辐照组用Opti-MEM液替代EGFP；单纯质粒组用Opti-MEM液替代sonovue；辐照+质粒组为上述配比转染液。转染后72 h荧光显微镜下观察细胞内绿色荧光蛋白的绿色荧光，western blot检测细胞内绿色荧光蛋白的含量。统计方法采用单因素方差分析。