肠三叶因子对非酒精性脂肪性肝炎大鼠回肠黏液屏障的影响

目的 研究非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肠道黏液屏障改变,探讨肠三叶因子(TFF3)对NASH大鼠肠道黏液屏障的影响,及其对NASH的治疗作用.方法 将清洁级雄性SD大鼠60只随机分为正常组、模型组和治疗组,每组20只.正常组给予普通饲料,模型组和治疗组给予高脂饲料12周,诱导NASH模型后,治疗组给予rhTFF3 1 ml·kg-1·d-1(浓度0.1 mg/ml)腹腔内注射,正常组与模型组给予1 ml·kg-1 ·d-1生理盐水,连续3周.第15周末,FITC标记的右旋糖酐灌胃检测大鼠回肠通透性后,处死大鼠,检测血清AST、ALT、TC、TG、内毒素(ET)水平及二胺氧化酶(DAO)活性.HE染色观察肝脏和回肠末端组织病理变化,PAS染色观察回肠末端杯状细胞并计数,免疫组化方法检测回肠末端紧密连接蛋白Occludin和TFF3蛋白表达水平,实时荧光定量PCR检测TFF3 mRNA转录水平.计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验.结果 大鼠血清AST、ALT、TG、TC、DAO、ET水平在模型组升高,而治疗组较模型组明显下降(P值均＜0.01);模型组NAS评分较正常组显著增高(P＜0.01),而治疗组肝组织炎症改善,NAS评分较模型组明显降低(P＜0.01);光镜下模型组回肠末端细胞坏死,绒毛损伤,杯状细胞明显减少,治疗组绒毛损伤修复,杯状细胞增多;模型组大鼠回肠通透性与正常组比显著增加,治疗组较模型组明显降低(P值均＜0.01);Occludin和TFF3在模型组表达减少,而治疗组较模型组增多(P值均＜0.01);回肠末端TFF3 mRNA转录水平模型组较正常组下调,治疗组表达较模型组上调(P值均＜0.01).结论 NASH大鼠存在肠道杯状细胞损伤,黏液屏障功能障碍,TFF3可以修复回肠末端损伤,促进杯状细胞再生与黏液分泌,修复肠屏障功能,降低肠通透性,对NASH起到治疗作用.