缺氧加重淀粉样β蛋白对神经细胞毒性作用的通路探讨

目的 探讨缺氧加重淀粉样β蛋白(Aβ)对神经细胞毒性作用的通路. 方法 体外培养入神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y细胞),细胞分为对照组、Aβ干预组、缺氧组、Aβ干预十缺氧组,采用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测细胞中p21激活激酶1(PAK1)、LIM激酶(LIMK1)、cofilin mRNA表达水平,用免疫印迹(Western blot)检测细胞中PAK1、LIMK1、磷酸化LIMK1 (P-LIMK1)、cofilin、磷酸化cofilin(P-cofilin)蛋白表达水平. 结果 Aβ处理后,SH-SY5Y细胞的活力减少;与对照组比较,10μmol/L Aβ干预SH-SY5Y细胞24 h后,PAK1、LIMK1、P-LIMK1、P-cofilin蛋白表达量减少(均P＜0.05),PAK1和LIMK1的mRNA表达减少(P＜0.05),cofilin蛋白和mRNA表达差异无统计学意义.10 μmol/L Aβ+2％氧气干预条件下处理SH-SY5Y细胞24 h后,与Aβ干预组比较,PAK1、LIMK1、P-LIMK1、P-cofilin蛋白表达量减少(均P＜0.05),PAK1和LIMK1的mRNA表达减少,且差异有统计学意义(均P＜0.05),cofilin蛋白和mRNA表达差异无统计学意义. 结论 Aβ可能通过抑制PAK1的活性来减少P-LIMK1,进而导致eofilin磷酸化减少,去磷酸化cofilin形成增多,导致神经元的损伤,缺氧通过该通路加重Aβ对神经细胞的毒性作用.