非酒精性脂肪性肝病小鼠肝组织脯氨酰内肽酶蛋白及其活性变化

目的 观察高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)小鼠肝脏脯氨酰内肽酶(PREP)蛋白水平及活性的变化.方法 随机将40只雄性C57BL/6J小鼠分成普通饲料和高脂饲料喂养组,分别在喂养4 w和16 w处死小鼠.检测血生化指标,观察肝组织病理学变化并计算NAFLD活动度积分(NAS);采用荧光定量PCR法、Western blot法和Suc-Gly-Pro-AMC底物法分别检测肝组织PREP mRNA、蛋白水平和活性变化.结果 在高脂饮食喂养4 w,模型组小鼠肝细胞出现轻度脂肪变,NAS积分为(3.43±0.79),较对照组显著升高;在高脂饮食喂养16 w,模型组小鼠体质量、肝指数、ALT、甘油三脂、总胆固醇和空腹血糖分别为(32.93±2.72)g、(4.64±0.46)%、(53.64± 22.01)IU/L、(1.18±0.17)mmol/L、(4.34±0.44)mmol/L和(5.67±0.87)mmol/L,显著高于对照组[分别为(28.19±1.23) g、(4.02±0.11)%、(28.60±4.01)IU/L、(0.99±0.15)mmol/L、(2.94±0.18)mmol/L和(4.26±0.65)mmol/L,P<0.05];模型组肝组织NAS积分为(5.60±1.43),显著高于对照组[(0.40±0.70),P<0.01];PREP蛋白水平与对照组相比无显著性差异,但PREP mRNA水平和酶活性分别为对照组的(1.81±0.34)倍(P<0.01)和(1.36±1.78)倍(P<0.05).结论 小鼠肝组织PREP活性变化可能参与了小鼠非酒精性单纯性脂肪肝向脂肪性肝炎的转变.