氧化苯砷体外对大鼠原代肝星状细胞活化的阻抑作用研究

目的 探讨氧化苯砷(PAO)对肝星状细胞(HSC)活化的影响.方法 采用密度梯度离心法提取SD大鼠原代HSC,在倒置显微镜下观察HSC形态的改变;以25、50、100、150和200 nmol/L浓度PAO处理活化的HSC-T6细胞,以四甲基偶氮唑盐(MTT)法评估PAO的细胞毒性;分别以25、50、100 nmol/L浓度的PAO处理离体培养4d的HSC 72 h,并设对照组,采用Western blot和Real-time PCR法检测各组细胞α-SMA和Ⅰ型胶原mRNA和蛋白表达.结果 原代HSC离体培养过程中α-SMA表达量逐渐升高,与培养1d时(0.762±0.062)比,培养4d时其α-SMA蛋白表达[(1.51±0.045),P＜0.05]显著升高;PAO在25～100 nmo/L浓度范围内对活化的HSC无明显的细胞毒性,但能浓度依赖性抑制活化的HSC α-SMA和I型胶原mRNA水平和蛋白表达.结论 离体培养4d时,HSC呈初始活化状态.PAO在25～ 100 nmol/L范围可浓度依赖性地阻抑离体培养的HSC的自发激活,提示PAO有潜力成为一类新型的抗肝纤维化药物.