人结直肠癌LoVo/HCT116细胞来源外泌体促肿瘤迁移能力及Wnt3a/Wnt5a蛋白鉴定

目的 鉴定人结直肠癌LoVo/HCT116细胞上清外泌体中Wnt3a和Wnt5a蛋白的表达情况,探讨外泌体对人结直肠癌迁移的调节作用.方法 培养人结直肠癌LoVo/HCT116细胞,提取上述两种细胞的上清液抽提外泌体,运用透射电镜、纳米颗粒跟踪分析仪(NTA)、蛋白印迹法(Western blot)对外泌体进行鉴定.结果 透射电镜下观察到外泌体具有膜结构,NTA检测提示粒径大小主要分布在94 nm左右,可检测到外泌体膜标志蛋白HSP70、CD63、CD9以及Wnt3a、Wnt5a表达.人结直肠癌LoVo/HCT116细胞外泌体能被人结直肠癌细胞摄取,并对人结直肠癌细胞迁移有促进作用.结论 人结直肠癌LoVo/HCT116细胞能抽提得到外泌体,外泌体表达膜标志蛋白HSP70、CD63、CD9以及Wnt3a、Wnt5a蛋白.外泌体能被结直肠癌细胞吸收,而吸收了外泌体的人结直肠癌细胞其迁移能力增强.