白细胞介素22介导转化生长因子-β1高表达与糖尿病肾纤维化相关性分析

目的 探讨白细胞介素22(IL-22)对糖尿病肾纤维化的作用及机制.方法 将C57 BL/6小鼠分为正常对照组(NC组)、糖尿病肾病对照组(DN组)、重组IL-22(rIL-22)组和IL-22中和抗体(Anti-IL-22)组,糖尿病造模成功8周后,按分组给予200 ng/g rIL-22、Anti-IL-22或等量0.1%牛血清白蛋白(BSA)腹腔注射,每周2次,连续4周.干预结束后,测定血糖、肾功能和24 h尿微量白蛋白/肌酐比值,光镜下观察小鼠肾脏病理学改变和胶原沉积情况,同时对肾组织硬化及纤维化指标进行半定量评定,实时荧光定量PCR分析肾脏组织转化生长因子-β1(TGF-β1)基因转录水平,Western印迹法检测肾脏组织 α-平滑肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和纤连蛋白(FN)表达水平,免疫组化分析肾脏组织胶原纤维Ⅲ(collagenⅢ)表达水平.结果 干预4周后,Anti-IL-22组24 h尿微量白蛋白/肌酐比值显著降低(P<0.05).光镜下可见糖尿病小鼠肾小管上皮细胞空泡变性、蛋白管型形成和肾小球系膜扩张,rIL-22组上述病变更广泛,而Anti-IL-22组病变程度得以改善,胶原沉积情况与肾小管损伤分数一致.实时荧光定量PCR发现rIL-22组TGF-β1 mRNA显著升高(P<0.01).免疫印迹发现rIL-22组肾小管上皮-间充质转分化(EMT)标志物 α-SMA显著升高(P<0.05)和E-cadherin显著下降(P<0.05),且细胞外基质(ECM)蛋白FN显著升高(P<0.05).免疫组化发现rIL-22组collagenⅢ显著升高(P<0.05).结论 IL-22可能通过介导肾小管上皮细胞TGF-β1的高表达,诱导EMT发生和促进ECM积聚,加速糖尿病肾纤维化.