miR-374促进急性心肌梗死诱导心肌纤维化的机制

目的 研究微小RNA(mi R)-374通过调控白细胞介素(IL)-10对急性心肌梗死(AMI)诱导心肌纤维化的影响.方法 采用实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测AMI患者和健康对照组血清中miR-374的表达水平.构建AMI小鼠模型,随机分为假手术组(n=6)、AMI组(n=12)、AMI+miR-374组(n=12,AMI小鼠心肌注射miR-374).采用qRT-PCR检测假手术组和AMI组心肌组织中miR-374的表达水平及各组Ⅰ型胶原(COL1)A1和Ⅲ型胶原(COL3) A1 mRNA表达水平.检测各组心脏功能,记录左室射血分数(LVEF)、左室长轴缩短分数(FS)、左室舒张末期内径(LVDd)和左室收缩末期内径(LVDs).比色法检测各组半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶(Caspase)3和Caspase8活性.Massontrichrome染色检测各组心肌纤维化程度.miR靶基因数据库预测IL-10为miR-374的潜在靶基因并采用荧光素酶报告基因法验证.采用qRT-PCR检测转染miR-374 mimics对IL-10 mRNA表达的影响.采用Western印迹检测AMI组和AMI+miR-374组心肌组织中IL-10、P65和P50蛋白表达.结果 AMI患者血清中miR-374的表达水平明显高于健康对照组(P＜0.001).AMI组心肌组织中miR-374表达水平明显高于假手术组(P＜0.001).相比AMI组,AMI+miR-374组LVEF和FS明显降低、LVDd和LVDs明显升高、Caspase3和Caspase8活性明显升高、COL1A1和COL3A1 mRNA表达水平明显升高、心肌纤维化程度增加(P＜0.05、P＜0.01、P＜0.001).miR-374可靶向调控IL-10并抑制其mRNA表达.相比AMI组,AMI+miR-374组心肌组织中IL-10蛋白表达明显降低,而P65和P50蛋白磷酸化明显增加(p＜0.05).结论 miR-374可能通过抑制IL-10的表达显著促进心肌梗死诱导心肌纤维化的发展.