EPO衍生肽对大鼠缺血再灌注损伤脑微血管内皮细胞的保护作用
Chinese Journal of Gerontology(2020)
摘要
目的 建立模拟缺血/再灌注(I/R)模型观察促红细胞生成素(EPO)衍生肽(HBSP)对I/R的脑微血管内皮细胞(BMECs)的保护作用,并探讨其作用的可能信号传导通路.方法 分离培养大鼠BMECs,建立模拟SI/R损伤模型,随机分为对照组、I/R组、I/R+HBSP组(HBSP组分别选择2.5、25.0、50.0、100.0 ng/ml浓度),通过噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况,原位细胞凋亡检测(TUNEL)法检测BMECs的凋亡,以确定药物作用的最适浓度.采用Western印迹法检测蛋白激酶B(Akt)及磷酸化的Akt、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及磷酸化的mTOR、核糖体40 S小亚基S6蛋白激酶(p70S6K)及磷酸化的p70S6K蛋白表达.结果 I/R损伤抑制实验组细胞增殖,促进其凋亡.HBSP可以改善I/R后实验细胞的增殖情况,抑制其凋亡.HBSP可上调Akt,mTOR及p70S6K蛋白的磷酸化表达.结论 HBSP通过激活磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/Akt/mTOR信号通路对I/R损伤的BMECs起到保护作用.
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